重组人FOXL2基因的原核表达和纯化研究

• 作者: 吴瑞卿 唐胜建 张伟 张坤 高莎莎
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: FOXL2l基因 原核表达 纯化 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-15
• 分类号: Q78
• 字数: 4251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.01.003

摘要

目的 通过pET32a(+)原核表达载体,表达重组人叉头框蛋白L2(human forkhead box L2,FOXL2l),并且进行纯化和鉴定.方法 从正常人血液中提取基因组DNA,利用PCR扩增FOXL2l目的 基因片段,构建FOXL2l原核表达重组质粒[pET32a(+)-FOXL2l]并转化E.coli的BL21(DE3)菌株,IPTG诱导重组蛋白表达,经His TrapTM FF亲和层析柱纯化,再通过SDS-PAGE和Western印迹鉴定.结果 成功克隆到大小为1 131 bp的人源FOXL2l基因片段并准确插入表达载体pET32a(+),0.1 mmol/L IPTG诱导转化菌8 h可表达大量的FOXL2l蛋白,并可经His TrapTM FF柱亲和层析得到高度纯化.结论 成功获得纯化的66 kD重组人FOXL2l蛋白,为后续进行FOXL2l蛋白的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐胜建	山东省潍坊医学院整形外科研究所	10	53	4.0	7.0
2	张伟	山东省潍坊医学院整形外科研究所	23	49	5.0	6.0
3	高莎莎	山东省潍坊医学院整形外科研究所	3	35	2.0	3.0
4	张坤	山东省潍坊医学院整形外科研究所	5	3	1.0	1.0
5	吴瑞卿	山东省潍坊医学院整形外科研究所	1	2	1.0	1.0