川西高原黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C基因的原核表达

• 作者: 刘东奇 刘浩浩 张庆莲 李蒙 梁正旭 贺庆华
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 黑唇鼠兔 乳酸脱氢酶C 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2011,（14）
• 所属期刊栏目: 动物与饲料科学
• 页码范围: 8622-8623,8626
• 分类号: S858.291
• 字数: 2048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.14.163

摘要

[目的]研究黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C(LDH-C)基因的原核表达及重组蛋白的纯化.[方法]采用RT-PCR方法克隆鼠兔LDH-C基因,并将其连接到表达载体pET-32a上,构建鼠兔LDH-C基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,通过IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE进行分析,使用亲和层析方法进行蛋白纯化.[结果]RT-PCR扩增出1条约1.0 kbp的条带,与预期结果相符;重组表达载体经PCR和双酶切鉴定,产生1个约1.0 kbp的目的片段,表明表达载体构建成功;表达产物经SDS-PAGE分析,得到了分子量略大于45.0kDa以包涵体形式存在的融合蛋白;通过镍亲和层析柱进行纯化,得到了较纯的融合蛋白.[结论]黑唇鼠兔LDH-C基因被成功克隆和表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘浩浩	西南民族大学生命科学与技术学院	4	7	2.0	2.0
2	贺庆华	西南民族大学生命科学与技术学院	22	81	5.0	8.0
3	张庆莲	成都医学院检验医学院临床生化教研室	22	83	5.0	8.0
4	刘东奇	西南民族大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0
5	李蒙	西南民族大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0