重组高原鼠兔瘦素原核表达载体的构建、蛋白表达及纯化

• 作者: 杨洁 赵新全 邓治莲
• 来源期刊: 兽类学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 高原鼠兔 瘦素原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 316-320
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 4114字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1050.2009.03.012

摘要

瘦素(leptin)由ob基因编码,对调节能量代谢起着重要作用.本研究建立了高原鼠兔瘦素的原核表达系统,并对其进行了原核表达.研究中作者从高原鼠兔瘦素基因的cDNA文库中,扩增编码高原鼠兔瘦素的核酸序列,并利用DNA基因重组技术将其克隆到原核表达载体pET30a(+)中,构建了高原鼠兔瘦素原核表达载体pET30a(+)/ppleptin.对目的片段进行测序确认后,将其转化到大肠杆菌BL21中,并利用IPTG诱导外源性目的蛋白表达.表达的包涵体蛋白经溶解及变性后上柱纯化.重组质粒经测序检测后,表明原核载体构建正确.同时,SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,重组菌在16KD处有明显新增条带,纯化后的目的蛋白条带纯度较高.该结果为高原鼠兔瘦素的后续基础研究提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵新全	中国科学院西北高原生物研究所青藏高原生物进化与适应重点实验室	230	5718	40.0	63.0
2	杨洁	河北医科大学公共卫生学院	44	194	8.0	11.0
3	邓治莲	中国科学院西北高原生物研究所青藏高原生物进化与适应重点实验室	1	1	1.0	1.0