PML-RARα245-hIL-2双基因表达载体的构建和表达研究

• 作者: 周羽竝 岑东芝 李扬秋 杨力建 胡刚 陈少华
• 来源期刊: 沈阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: PML-RARα融合基因 hIL-2 急性早幼粒细胞白血病 DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学与临床医学研究
• 页码范围: 69-72
• 分类号: R733.71
• 字数: 3050字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-2344.2012.02.002

摘要

目的:采用长度为245 bp的PML-RARα融合基因片段构建一种新的PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒.方法:利用RT-PCR从NB4细胞的RNA中扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp的基因片段,通过RT-PCR从Jurkat细胞中扩增hIL-2基因,并将两基因片段分别克隆到pIRES质粒中,通过酶切和测序验证重组质粒的正确性.将重组质粒转染A549细胞,通过RT-PCR检测该质粒在真核细胞中的转录情况,利用点杂交和ELISA技术检测目的蛋白的表达.结果:Nhe L/Mlu Ⅰ和Sal Ⅰ/Not Ⅰ双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα融合基因片段和hIL-2基因,测序结果证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确.将构建的pIRES-PML-RARα245 -hIL-2质粒转染A549细胞后经RT-PCR鉴定表明,插入到重组质粒中的PML-RARα和hIL-2基因能够在真核细胞中进行正常转录并翻译出相应蛋白.结论:成功构建了含有245 bp的PML-RARα基因与hIL-2基因的真核双表达载体,该载体能够在真核细胞中正常转录并翻译出PML-RARα和hIL-2蛋白,为利用DNA疫苗治疗急性早幼粒细胞白血病提供了更丰富的资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李扬秋	暨南大学医学院血液病研究所	222	807	12.0	17.0
5	周羽竝	暨南大学医学院生物化学教研室	45	195	7.0	11.0
6	杨力建	暨南大学医学院血液病研究所	151	579	10.0	16.0
7	陈少华	暨南大学医学院血液病研究所	170	604	10.0	15.0
8	岑东芝	暨南大学医学院血液病研究所	16	41	4.0	4.0