利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究

• 作者: 于耀华 张柏顺 晁祥建 朱云 李广存 杨煜 樊娜娜 郭宝太 郭晓 金黎平
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 二倍体马铃薯 StRLK基因 遗传转化 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 页码范围: 18-22
• 分类号: Q78|S532.03
• 字数: 4071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.04.004

摘要

植物类受体蛋白激酶( Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用.在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK.利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK.进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1- StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株.用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1- StRLK成功转入ED13.以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1- StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据.