构建逆转录病毒pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及稳定转染细胞

• 作者: 范志朋 马玉实
• 来源期刊: 口腔生物医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 克隆构建 FBXL11 逆转录病毒 间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 113-116
• 分类号: Q782
• 字数: 3821字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8603.2012.03.001

摘要

目的:构建pQCXIH-HA-FBXL11逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11的稳定转染细胞.方法:以牙髓干细胞的cDNA为模板,利用PCR方法扩增目的基因FBXL11,PCR产物纯化回收、连接、酶切、测序鉴定,构建pQCXIH-HA-FBXL11质粒.利用FuGENE6转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法和实时荧光定量PCR法在蛋白及mRNA水平检测HA-FBXL11的表达.利用逆转录病毒感染牙髓间充质干细胞.结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pQCXIH-HA-FBXL11,蛋白及mRNA水平检测证实其在293T细胞可以有效的表达.成功建立了过表达HA-FBXL11的牙髓间充质干细胞稳定转染细胞.结论:通过构建pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11稳定转染细胞,为进一步研究FBXL11对间充质干细胞的功能调控奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范志朋	首都医科大学附属北京口腔医院研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室	23	53	4.0	6.0
2	马玉实	首都医科大学附属北京口腔医院研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室	4	12	2.0	3.0