荧光定量PCR检测土拨鼠肝炎病毒核酸方法的建立

• 作者: 刘江宁 沈绍伟 肖冲 范晓旭
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 土拨鼠肝炎病毒 DNA检测 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 57-61
• 分类号: R332
• 字数: 2131字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2012.06.013

摘要

目的 建立土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)核酸的荧光定量PCR( Real-time PCR)检测方法,应用于土拨鼠肝炎病毒模型的研究.方法 分别根据土拨鼠肝炎病毒核心抗原(WHcAg)和表面抗原(WHsAg)的DNA序列设计13对扩增引物,从中筛选无非特异性扩增及引物二聚体且灵敏度高的引物,用于土拨鼠血清中WHV DNA的Real-time PCR检测.建立感染土拨鼠肝炎病毒的土拨鼠血清中WHV核酸的Real-timePCR检测方法.结果 根据WHsAg基因的5'端设计的一对引物WHVSF1与WHVSR1,检测灵敏度可达1×101拷贝/μL,病毒拷贝数与Real-time PCR Ct值的标准曲线的R2值为0.997,且电泳未见明显非特异性条带及引物二聚体.结论 建立了土拨鼠血清中WHV DNA的Real-time PCR检测方法,该方法为进一步研究土拨鼠肝炎病毒模型奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范晓旭		1	0	0.0	0.0
2	肖冲		1	0	0.0	0.0
3	沈绍伟		1	0	0.0	0.0