人胰淀素类似物普兰林肽体外活性测定方法的建立

• 作者: 张齐好 王欢歌 肖雪 胡浩 苏志坚 项琪 黄亚东
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 普兰林肽 人胰淀素类似物 L6细胞 活性测定
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 355-360
• 分类号: R587.1
• 字数: 4677字
• 语种: 中文

摘要

建立体外人胰淀素类似物普兰林肽活性测定的方法,为普兰林肽及其制剂的质量控制提供可靠的细胞检测方法.将L6细胞培养并分化成有明显肌管的成熟骨骼肌细胞,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)检测普兰林肽对高糖培养环境下骨骼肌细胞葡萄糖吸收的影响.结果显示,在1×10-9～1×10-5 mol/L的浓度范围内,普兰林肽能显著增加分化后的L6细胞的糖吸收量,在16h达到最大值.普兰林肽浓度的负对数(x)与细胞糖吸收增加量(y)间呈现出良好的线性关系(y=-4.750x+ 59.54,R2 =0.991 9).应用本实验建立的方法检测了市售普兰林肽醋酸盐注射剂的活性,结果显示1×10-6、1×10-7和1×10-8 mol/L的普兰林肽注射剂作用于分化的L6细胞16h,细胞的糖吸收增加率为(61.89±9.54)％,(43.68±10.06)％和(33.30±13.03)％(P＜0.01)；与单用胰岛素组对比,普兰林肽与胰岛素联合使用能显著提高分化后的L6细胞的糖吸收量(P＜0.05),与普兰林肽注射剂的临床使用结果一致.本实验为普兰林肽的活性测定提供了一种稳定可靠的细胞替代模型.