鸭肠炎病毒gD基因胞外区的原核表达及在感染鸭胚成纤维细胞中的定位

• 作者: 付培芬 刘琰 徐凝 母晓宇 王君伟 董井泉 马波
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭肠炎病毒 gD 原核表达 噬斑减数中和试验 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 922-927
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 3960字
• 语种: 中文

摘要

以本实验室获得的鸭肠炎病毒(DEV) C-KCE株US区基因序列(GenBank登录号EU714267)为基础PCR扩增出gD基因胞外区(gDw),将其定向克隆至原核表达载体pET-30a(+)并转化至大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLys.经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明gD基因胞外区在大肠杆菌中获得与预期大小相符的表达蛋白.重组蛋白纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,血清琼扩效价达1∶16,噬斑减数中和试验测定血清中和抗体效价达1∶64.通过免疫荧光技术首次对gD进行亚细胞定位检测,结果表明DEV感染鸭胚成纤维细胞(DEF)后4h近核区域细胞质内首先开始出现荧光,12h以后显著增加,明显的点状绿色荧光广泛存在于胞质中.本研究为进一步开展DEV gD的功能研究提供了重要数据和材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马波	东北农业大学动物医学学院	71	491	14.0	18.0
2	王君伟	东北农业大学动物医学学院	214	1491	20.0	26.0
3	母晓宇	东北农业大学动物医学学院	7	22	3.0	4.0
4	徐凝	东北农业大学动物医学学院	6	16	2.0	4.0
5	刘琰	东北农业大学动物医学学院	3	3	1.0	1.0
6	付培芬	东北农业大学动物医学学院	3	3	1.0	1.0
7	董井泉	东北农业大学动物医学学院	6	30	3.0	5.0