鸭肝炎病毒Ⅰ型基因片段的原核表达及单克隆抗体的制备

• 作者: 孙凤萍 高骏
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭肝炎病毒Ⅰ型 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-20
• 分类号: S858.32
• 字数: 3439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3924.2012.02.005

摘要

根据Genebank上已报道的鸭肝炎病毒Ⅰ型基因的全长序列,设计了1对引物,通过RT-PCR方法扩增出特异的DHV-Ⅰ基因片段；将该片段克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌Rosetta-gami(DE3),并用IPTG诱导表达后,通过Ni柱纯化,获得了表观分子量在20 kD左右的融合表达蛋白;将表达纯化后的蛋白作为抗原,免疫BALB/c健康小鼠,筛选和制备了1株DHV-Ⅰ单克隆抗体细胞株.Western-blot及ELISA分析表明:表达的重组蛋白均能与鸭DHV-Ⅰ阳性血清和制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体产生反应.同时,制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体除了能与重组蛋白反应,还能识别天然的DHV-Ⅰ病毒蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高骏	上海市农业科学院畜牧兽医研究所	31	77	5.0	7.0
2	孙凤萍	上海市农业科学院畜牧兽医研究所	33	87	5.0	8.0