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摘要:
目的 构建针对垂体腺瘤细胞系AtT20的高效率沉默PTTG基因的shRNA表达载体.方法 合成特异性干扰PTTG基因的小发卡RNA(shRNA)片段,并与pGenesil2载体连接,构建PTTG干扰载体(pGenesil2-PTTG shRNA).利用脂质体将其转染AtT20细胞,分为正常细胞对照组、阴性对照组和3个shRNA干扰组(pGenesil2-PTTG siRNA1、2及3),应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Westem blot法分析转染后AtT20细胞中PTTG的mRNA和蛋白表达水平.结果 酶切证实PTTG-shRNA表达载体构建成功;转染效率可达75%左右.转染pGenesil2-PTTG shRNA后,3个干扰组的AtT20细胞中PTTG的mRNA和蛋白表达水平均较正常对照组显著降低(P<0.01).结论 成功构建了能高效沉默PTTG的RNAi表达载体;且pGenesil2-PTTG siRNA高效地抑制了垂体腺瘤细胞AtT20细胞中PTTG綦因的表达.
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文献信息
篇名 PTTG基因siRNA载体的构建与鉴定
来源期刊 解剖学研究 学科 医学
关键词 PTTG RNA 干扰 垂体腺瘤
年,卷(期) 2012,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 280-283
页数 分类号 R73-36
字数 3743字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-0770.2012.04.010
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 郭开华 中山大学中山医学院人体解剖学教研室 139 931 17.0 20.0
2 邹俊涛 中山大学中山医学院人体解剖学教研室 28 51 4.0 6.0
3 沈云龙 从化市中心医院神经外科 3 3 1.0 1.0
4 崔玉婷 从化市中心医院神经外科 3 3 1.0 1.0
5 朱建峰 从化市中心医院神经外科 1 1 1.0 1.0
6 吕兰海 中山大学中山医学院人体解剖学教研室 5 9 2.0 2.0
7 武凤鸣 中山大学中山医学院人体解剖学教研室 6 23 3.0 4.0
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干扰
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解剖学研究
双月刊
1671-0770
44-1485/R
大16开
广州市中山二路74号中山大学北校区
46-269
1979
chi
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