常见7种食源性致病菌xMAP液相芯片快速筛查方法的建立及应用

• 作者: 吕东月 吴平芳 扈庆华 李迎慧 林一曼 石晓路 贺连华 邱亚群 陈妙龄
• 来源期刊: 卫生研究
• 学科: 医学
• 关键词: 食源性致病菌 xMAP液相悬浮芯片技术 多重检测
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 96-101
• 分类号: R155.51
• 语种: 中文

摘要

目的 采用xMAP液相悬浮芯片检测方法,建立一管同时检测金黄色葡萄球菌、沙门菌、副溶血弧菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157∶H7、创伤孤菌和空肠弯曲菌的快速筛查方法.方法 根据GenBank公布的金黄色葡萄球菌肠毒素nuc基因、沙门菌侵袭性基因ssaR、副溶血孤菌通用基因toxR、单增李斯特菌的hlyA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因、创伤弧菌的vvh基因和空肠弯曲菌的gyrA基因,设计特异性引物和探针,利用上游引物和生物素标记的下游引物对7个靶序列进行不对称实时PCR扩增,7重实时PCR扩增产物和制备的7种偶联探针的微球在同一体系中进行杂交,最后利用藻红蛋白和生物素的亲和作用报告荧光,从而建立7种食源性致病菌的xMAP液相悬浮芯片检测法.结果 xMAP液相悬浮芯片体系检测140株菌株,均出现特异性荧光中值信号,7种食源性致病菌检测互不干扰.DNA和菌液检出限分别为1 ～100ng和105～ 108cfu/ml对56份各类食品标本进行检测,检出金黄色葡萄球菌2份、沙门菌4份、副溶血孤菌7份、单增李斯特菌1份、创伤孤菌3份,未检出大肠杆菌O157∶H7和空肠弯曲菌,此结果与传统方法分离结果相一致.结论 xMAP液相悬浮芯片技术从样品处理到检测结果需3.5h左右,该方法可应用于食品安全风险监测中食源性致病菌的快速筛查和食源性致病菌的分型鉴定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林一曼		54	333	10.0	15.0
2	石晓路		61	452	12.0	18.0
3	邱亚群		43	198	8.0	10.0
4	扈庆华		62	498	12.0	19.0
5	贺连华		22	243	10.0	15.0
6	吴平芳		19	185	8.0	13.0
7	李迎慧		40	190	8.0	10.0
8	吕东月		9	39	3.0	5.0
9	陈妙龄		1	14	1.0	1.0