白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p的原核细胞表达及鉴定

• 作者: 史利宁 孔倩倩 廖红 李芳秋 胡毓安 马春芳
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 白念珠菌 H3K4甲基转移酶 基因克隆 原核细胞表达
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 919-921,930
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 3392字
• 语种: 中文

摘要

目的 原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性.方法 用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对.选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板,PCR扩增Set1-208p的编码基因,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白质表达.用抗His标签的单克隆抗体鉴定融合蛋白,并用确诊侵袭性白念珠菌感染(IC)患者血清进行抗原性鉴定.结果 成功克隆了白念珠菌抗原特异性H3K4甲基转移酶片段Set1-208p基因并诱导表达,获得了纯化的重组肽段,所得蛋白质分子量(Mr)约为29000,带有His标签,经western blot鉴定,诱导的重组蛋白可与IC患者血清特异性反应.结论 成功诱导表达了具有良好抗原反应性的Set1-208p重组蛋白质,为建立相应的抗原、抗体ELISA检测方法提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李芳秋	南京军区南京总医院临床中心实验科	93	590	11.0	20.0
2	史利宁	南京军区南京总医院临床中心实验科	75	319	10.0	15.0
3	胡毓安	南京军区南京总医院临床中心实验科	33	316	10.0	17.0
4	马春芳	南京军区南京总医院临床中心实验科	8	38	4.0	6.0
5	孔倩倩	南京师范大学生命科学学院	5	34	4.0	5.0
7	廖红	南京师范大学生命科学学院	7	30	3.0	5.0