无病毒可回复性肝细胞永生化载体的构建和结构鉴定

• 作者: 刘思德 张洁 李爱民 林建华 燕群 王亚东 王泽楠 白杨 罗晓蓓
• 来源期刊: 现代消化及介入诊疗
• 学科: 医学
• 关键词: 生物人工肝 肝细胞永生化 人端粒酶逆转录酶 piggyBac转座子
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 61-65
• 分类号: R657.3
• 字数: 3242字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2159.2012.02.001

摘要

目的 构建不携带病毒基因且可回复的肝细胞永生化载体,优化目前的肝细胞永生化方法.方法 构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的无病毒可回复性肝细胞永生化载体,PCR扩增attB1-Kozak -hTERT(前端)-attB2和attB1 -hTERT(后端)/E2A/eGFP/F2A/neo-attB2,对相应大小条带切胶回收后,通过Gateway重组克隆技术BR反应和LR反应,以及酶切连接,构建最终目的载体PB -hTERT/E2A/eGFP/F2A/neo.结果 PCR及酶切和测序鉴定均证实成功构建了肝细胞永生化载体PB-hTERT/E2A/eGFP/F2A/neo,目的基因序列与GenBank报道一致.结论 成功构建不携带病毒基因且可实现回复的肝细胞永生化载体,有望提高永生化肝细胞临床应用的安全性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林建华	南方医科大学南方医院肝胆外科	29	86	5.0	7.0
2	白杨	南方医科大学南方医院消化内科	107	348	10.0	15.0
3	王亚东	南方医科大学南方医院消化内科	22	92	7.0	9.0
4	李爱民	南方医科大学南方医院消化内科	63	256	9.0	12.0
5	张洁	南方医科大学南方医院消化内科	19	60	4.0	6.0
6	罗晓蓓	南方医科大学南方医院消化内科	4	3	1.0	1.0
7	王泽楠	南方医科大学南方医院消化内科	3	13	2.0	3.0
8	燕群	南方医科大学南方医院消化内科	3	5	2.0	2.0