摘要:
目的:对金莲花粗多糖进行分离纯化,研究纯化多糖的体外抗氧化作用,为进一步开发金莲花中药资源提供实验依据.方法:常规回流提取、乙醇沉淀得到金莲花粗多糖,经AB-8大孔吸附树脂脱色、脱蛋白后得精制的金莲花多糖(Trollius chinensis Bunge polysaccharide,TCBP),以蒸馏水、不同浓度的Nacl和NaOH溶液为洗脱剂,应用DEAE-52纤维素离子交换柱层析,Sephadex G-150凝胶过滤柱层析对得到的主要组分多糖进一步分离纯化,采用高效凝胶过滤色谱(high performance gels filtration chromagraphy,HPGPC)鉴定所得组分纯度并测定其相对分子质量,通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析多糖的单糖组成.通过水杨酸-Fe2+-H2O2体系(·OH)、二苯代苦味肼基自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl) hydrazyl,DPPH)体系和邻苯三酚自氧化(·O2-)法对分离纯化的金莲花多糖组分的抗氧化能力进行研究.结果:得到TCBP1,TCBP2,TCBP3,TCBP4四个多糖组分均为杂多糖,其中TCBP1分子量为3 283 220 Da、TCBP2分子量为156 819 Da、TCBP3分子量为10 949 Da、TCBP4分子量为1 068 Da;TCBP1,TCBP2,TCBP3,TCBP4均具有清除·OH的能力,其强弱顺序为:TCBP2>TCBP3>TCBP1 >TCBP4,TCBP2和TCBP3对DPPH具有一定清除作用,TCBP1,TCBP2,TCBP3,TCBP4均没有清除·O2-的能力.相反,还能诱导·O2-的产生,且随着它们浓度的增大,邻苯三酚自氧化程度也增强.结论:金莲花多糖为复杂的杂聚多糖,且具有一定的抗氧化活性.