森林脑炎病毒E基因DomainⅢ段的克隆表达及鉴定

• 作者: 康晓平 朱晓磊 李裕昌 杨银辉 林方 钱爱东
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 森林脑炎病毒 E基因 克隆表达
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 667-671
• 分类号: S855|Q786
• 语种: 中文

摘要

从森林脑炎病毒森张株的细胞培养液中提取总RNA,通过RT-PCR扩增E蛋白基因DomainⅢ段,克隆入原核表达载体GSTpET-30a(+)中,构建重组原核表达质粒,用IPTG诱导表达.表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化后,进行Western blot鉴定,并用针对不同病毒的兔免疫血清验证其检测特异性.重组原核表达质粒GSTpET-30a-ED3经酶切证明构建正确.表达的重组蛋白相对分子质量约为41 kD,主要以包涵体的形式表达,并可与TBE阳性兔免疫血清特异性反应.结果表明:成功克隆了森林脑炎病毒森张株E蛋白基因DomainⅢ段,并在大肠埃希菌BL21 (DF3)中表达,获得的ED3蛋白质具有良好的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱爱东	吉林农业大学动物科学技术学院	283	1216	15.0	21.0
2	杨银辉	军事医学科学院微生物流行病研究所	12	82	5.0	8.0
3	康晓平	军事医学科学院微生物流行病研究所	9	28	4.0	5.0
4	李裕昌	军事医学科学院微生物流行病研究所	6	15	2.0	3.0
5	朱晓磊	吉林农业大学动物科学技术学院	1	5	1.0	1.0
9	林方	军事医学科学院微生物流行病研究所	2	10	2.0	2.0