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摘要:
为研究胞内氯离子通道5基因(Chloride intracellular channel 5,CLIC5)广泛参与调节细胞内的各项生理活动与生化反应,并探讨该基因自身的表达调控机制,以小鼠基因组序列为模板,利用PCR技术扩增小鼠CLIC5基因5′上游调控序列,将其插入荧光素酶报告基因表达载体(pGL3-Basic)中,同时采用5′侧翼区缺失的方法构建了7个缺失不同DNA片段的荧光素酶表达载体。重组质粒与海肾荧光素酶载体(phRL-TK)共同瞬时转染HEK-293细胞,经双荧光素酶报告基因活性分析后,确定CLIC5基因的核心启动子区。利用生物信息学方法预测其中转录因子结合位点及启动子区甲基化状况。结果表明,CLIC5基因启动子缺乏TATA盒,但含有典型的GC盒及其他潜在转录因子结合位点;双荧光素酶报告基因活性分析表明,CLIC5基因-329~+1、-624~+1、-917~+1和-2 230~+1区域的启动子活性较高,其中-624~+1区域的启动子活性最强。进一步分析表明,启动子区-624~-329存在负性调控元件,预测存在转录因子结合位点RXR heterodimer binding sites与GC-Box factorsSp1/GC,-420~-283范围内存在CpG岛位点。
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文献信息
篇名 小鼠胞内氯离子通道5基因启动子核心功能区域鉴定及转录调控分析
来源期刊 中国农业大学学报 学科 生物学
关键词 CLIC5 表达调控 启动子 转录因子 CpG岛
年,卷(期) 2012,(5) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 137-143
页数 分类号 Q344.13
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 尹靖东 中国农业大学动物科学技术学院 29 517 13.0 22.0
2 刘洋 中国农业大学动物科学技术学院 84 853 16.0 26.0
3 吕文涛 中国农业大学动物科学技术学院 3 0 0.0 0.0
4 许玲 中国农业大学动物科学技术学院 2 10 1.0 2.0
5 巨婷婷 中国农业大学动物科学技术学院 1 0 0.0 0.0
6 于渤洋 中国农业大学动物科学技术学院 1 0 0.0 0.0
7 姜美华 中国农业大学动物科学技术学院 1 0 0.0 0.0
8 赵泽平 中国农业大学动物科学技术学院 1 0 0.0 0.0
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CLIC5
表达调控
启动子
转录因子
CpG岛
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