实时荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒

• 作者: 吕恒 张锦海 王平 王长军 顾海涛 鲁娟东
• 来源期刊: 解放军预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量RT-PCR H5亚型禽流感病毒(AIV H5) 血凝素基因
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 398-401
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 2839字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立快速检测H5亚型禽流感病毒HA基因的实时荧光定量RT-PCR方法,为禽流感病毒的监测和感染的预防控制提供科学的技术手段.方法 针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与荧光探针；通过体外克隆技术获得阳性定量标准品；优化探针、引物浓度、反应体系与反应条件,提高检测方法的特异性、敏感性与重复性,并进行定量分析.结果 反应体系具有良好的扩增效率,80 min内可完成扩增检测工作;检测灵敏度为100拷贝/反应,通过外标准品建立的标准曲线在一条直线上；3个外标准品的变异系数(CV)分别为2.60％、2.47％、2.44％；H5亚型禽流感病毒培养液、确诊人感染高致病性禽流感患者标本为阳性扩增结果,而其它流感病毒临床标本及阴性对照均呈阴性.结论 本研究建立的实时荧光定量RT-PCR方法具有敏感、快速、重复性好的特点,适合于H5亚型禽流感病毒的快速定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张锦海		42	165	8.0	9.0
2	王长军		134	625	12.0	17.0
3	顾海涛		20	70	5.0	7.0
4	王平		21	58	5.0	6.0
5	鲁娟东		4	21	3.0	4.0
6	吕恒		19	63	5.0	7.0