间接竞争性ELISA法快速诊断TGEV的研究

• 作者: 刘志强 徐义刚 朱振营 李一经 李丹丹 高慎阳
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: TGEV 单克隆抗体 间接竞争性ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1615-1623
• 分类号: S852.651
• 语种: 中文

摘要

利用基因工程技术制备的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）N基因原核表达产物重组N蛋白作为抗原诊断试剂，抗重组N蛋白的单克隆抗体作为抗体诊断试剂建立了间接竞争性ELISA检测细胞培养物中的TGEV病原的方法，并确定了间接竞争性ELISA操作流程中的最佳反应条件。在间接竞争性ELISA中，最佳抗原包被量为0．25卢g／孔；竞争抗原与单克隆抗体作用的最适时间为1h，反应温度为37℃；选择1h作为酶标抗体作用的最佳时间；底物液最佳作用时间为10min；选择样品的抑制率50％为其临界值；所用封闭液0．5％的聚乙烯醇PBS溶液在4℃冰箱中可密封保存6个月，封闭时间为120min；特异性试验表明与猪轮状病毒、猪流行性腹泻病毒等肠道腹泻性病毒均无交叉反应。本试验建立的间接竞争性ELIsA诊断方法具有良好的敏感性和特异性，为TGEV的疫情监测、及时而准确的诊断奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高慎阳	辽宁医学院畜牧兽医学院	51	336	9.0	16.0
2	李一经	东北农业大学动医学院	219	1679	20.0	27.0
3	徐义刚	黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心	33	254	9.0	13.0
4	朱振营	中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所	10	14	2.0	3.0
5	刘志强	海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	3	9	2.0	3.0
6	李丹丹		1	6	1.0	1.0