狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒系统的表达及鉴定

• 作者: 周继勇 张金阳 徐洁萍 昝洁 许运斌 阮系真
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病病毒 P蛋白 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659
• 字数: 3319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2012.02.003

摘要

为了建立狂犬病毒磷蛋白（phosphoprotein,P）的体外表达系统,本研究将RT-PCR扩增的狂犬病病毒ERA株P蛋白基因克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTA,构建重组质粒pFastBacHTA-P,并转染昆虫细胞Sf9包装形成重组杆状病毒。SDS-PAGE分析显示重组质粒pFastBacHTA-P转染的Sf9细胞中出现了分子量约为42 kDa的蛋白条带,Western blot证实分子量约为42 kDa的蛋白能与抗His的单克隆抗体发生特异性反应,间接免疫荧光（indirect immunofluorescence assay,IFA）分析进一步显示Sf9细胞表达的P蛋白与抗P蛋白单克隆抗体能特异性结合。这些实验证明,狂犬病病毒P蛋白不仅在Sf9细胞中获得表达,而且具有良好的免疫反应性。狂犬病病毒P蛋白杆状病毒表达体系的建立,为蛋白结构的解析和诊断试剂的研制奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮系真	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	5	8	2.0	2.0
2	许运斌	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	3	4	1.0	1.0
3	徐洁萍	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	2	9	1.0	2.0
4	张金阳	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	2	9	1.0	2.0
5	昝洁	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	1	1	1.0	1.0