水稻叶绿体转化载体pBS的构建及融合基因功能的初步鉴定

• 作者: 左佳 曹孟良 李丁 李祺 贺荣华 邢俊杰 韩小霞 高婧
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻 叶绿体转化 bar基因 绿色荧光蛋白(sGFP) 融合PCR
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 389-394
• 页数: 6页
• 分类号: Q343.3+7
• 字数: 3889字
• 语种: 中文

摘要

利用PCR方法分别从载体pchN-CAT-Bar和Psk51中分离得到编码膦丝菌素乙酰转移酶基因bar和绿色荧光蛋白基因sgfp,并在bar基因前段连接T7 leader sequence/5′-UTR和T7 10 N-terminus的8个氨基酸序列.运用融合PCR技术,得到bar和sgfp的融合基因片段BS.以水稻叶绿体基因组中的trnI和trnA为同源重组片段,来自烟草叶绿体16S rRNA的Prrn为启动子,psbA基因的TpsbA为终止子,融合片段作为双效筛选标记,构建水稻叶绿体转化栽体pBS.大肠杆菌原核表达检测到明显荧光,基因枪轰击TP309愈伤,筛选抗性愈伤.