Leber遗传性视神经病变基因治疗中ND4基因腺相关病毒的构建及检测

• 作者: 刘荣 徐凤岚 李斌 李涛 杜皓 王贵攀 胡维琨 裴晗
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: Leber遗传性视神经病变 NADH脱氢酶4 重组腺相关病毒
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 201-203
• 页数: 3页
• 字数: 3040字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人ND4基因腺相关病毒,为Leber遗传性视神经病变(leber hereditary optic neuropathy,LHON)的基因治疗做准备.方法 人工合成人的正常ND4基因,构建rAAV2/2-ND4重组腺相关病毒,进行纯化与浓缩后,用特异扩增ND4基因的引物进行PCR鉴定,用地高辛标记的Hl探针点杂交方法检测病毒液中rAAV2/2-ND4的物理滴度.结果 构建的rAAV2/2-ND4重组腺相关病毒能够特异地扩增出ND4目的基因条带,基因组测定物理滴度为400×109 vg·mL-1,证明该重组腺病毒携带目的基因.结论 本实验成功地构建了人ND4基因腺相关病毒,作为一种先进的载体系统,为今后Leber遗传性视神经病变患者的基因治疗奠定了基础.