以木糖异构酶基因作为选择标记的花生遗传转化

• 作者: 丁霄 乔利仙 王晶珊 隋炯明
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 花生 木糖异构酶基因 农杆菌介导法 遗传转化
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 444-448,483
• 分类号: S511
• 语种: 中文

摘要

用木糖异构酶基因xylA替换掉pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶基因（hygromycin-B-phosphotransferase,Hpt）,构建了植物表达载体pCAMBIA1301-xylA。再利用农杆菌介导法将pCAMBIA1301-xylA导入花生,转移到添加蔗糖（5g/L）和不同浓度木糖（5,10,20,30g/L）的体胚诱导及体胚萌发培养基上培养。对外植体成苗率及转基因阳性率进行统计,结果表明,当木糖浓度为10g/L时,诱导成苗率为15.25%,再生植株生长健壮,且转基因阳性率高达77.27%,最终确定10g/L为最适木糖筛选浓度。该筛选方法利用木糖作为筛选剂,可以避免利用抗生素筛选可能造成的安全隐患,转化效率高,是一种安全、高效的筛选方法。