枯草芽孢杆菌Bs-916草酸脱羧酶基因Bacisubin的克隆、原核表达及其表达产物的酶活性分析

• 作者: 于俊杰 俞咪娜 刘永锋 尹小乐 聂亚锋 胡建坤 陈志谊
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 草酸脱羧酶 基因克隆 酶活性
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 497-502
• 分类号: Q78
• 字数: 3179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2012.03.008

摘要

为明确枯草芽孢杆菌生防菌株Bs-916的抑菌蛋白质Bacisubin的编码基因,并初步解析Bacisubin的抑菌机理,根据该蛋白质的部分序列设计简并引物,获得了编码基因的部分序列,参考基因组数据库克隆了Bacisubin基因全序列.将Bacisubin基因克隆至PET28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达获得His标签融合蛋白质,并利用次甲基蓝-重铬酸钾法初步检测了该融合蛋白质的酶催化活性.克隆获得Bacisubin基因开放阅读框序列共1161bp,G+C含量为51.3%,可编码386个氨基酸,编码蛋白质与Bs-168菌株的草酸脱羧酶Yvrk蛋白质的氨基酸相似度为87%,与其他多种细菌和真菌的草酸脱羧酶的N端和C端Cupin活性中心区域和Mn2+结合区域高度保守.预测Bacisubin分子量为43 600,等电点为5.18,是较稳定的可溶性草酸脱羧酶,其催化最适pH为6.0左右,最适温度为30℃左右.说明枯草芽孢杆菌Bs-916的抑菌蛋白质Bacisubin为草酸脱羧酶,抑菌作用可能与其降解草酸的能力有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈志谊	江苏省农业科学院植物保护研究所	162	3643	34.0	51.0
2	刘永锋	江苏省农业科学院植物保护研究所	116	2469	28.0	44.0
3	于俊杰	江苏省农业科学院植物保护研究所	24	249	12.0	14.0
4	尹小乐	江苏省农业科学院植物保护研究所	20	233	12.0	14.0
5	俞咪娜	江苏省农业科学院植物保护研究所	17	164	9.0	12.0
6	胡建坤	江苏省农业科学院植物保护研究所	6	61	5.0	6.0
7	聂亚锋	江苏省农业科学院植物保护研究所	35	341	12.0	17.0