小鼠白介素17受体A胞外段的表达、纯化及鉴定

• 作者: Samuel Essien Baidoo 吴晶晶 朱晨露 汤新逸 王胜军 田洁 秦伟 袁靖 许化溪 陈娟 陈艳红 魏衍财
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠白介素17受体A 原核表达 纯化 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 282-285
• 分类号: R392.11
• 字数: 3056字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2012.04.002

摘要

目的:分别克隆小鼠白介素17受体A胞外段(mIL-17RAaa32-322)及小鼠IgG2AFc(mIgG2AFc)基因,构建mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白原核表达载体,并在体外表达、纯化及鉴定.方法:利用基因重组技术构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,并在E.coli Rosetta中表达mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,经镍离子螯合层析分离纯化后,用SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法进行鉴定.结果:成功构建pET32a(+)-mIL-17RA aa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,获得高效表达的融合蛋白,且蛋白质印迹证实为目的蛋白.结论:获得mIL-17RA aa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定基础.