人TLR1胞外段原核表达载体的构建、蛋白表达及纯化

• 作者: 周云刚 年四季 曹新梅 李祥 袁青 黄黎
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TLR1 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1106-1109
• 分类号: R392.11
• 字数: 3764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2010.12.011

摘要

目的:克隆、原核表达人Toll-like receptor1 (TLR1)胞外段基因,获得人TLR1胞外段蛋白.方法:RT-PCR扩增人TLR1胞外段基因,构建pET30(a)+/TLR1表达质粒,转染大肠杆菌BL21,在BL21细胞中表达TLR1胞外段蛋白,并进行纯化和Western blot 鉴定.结果:PCR扩增及重组质粒测序结果表明成功地构建了pET30(a)+/TLR1胞外段原核表达质粒,PCR扩增的目的基因大小为1 700 bp左右.表达的包涵体蛋白经溶解及变性后上镍亲和柱纯化,SDS-PAGE分析纯化产物在Mr为68 kD处有明显蛋白条带;Western blot ELISA结果显示,其表达纯化的蛋白为TLR1蛋白.结论:TLR1胞外段在大肠杆菌BL21中正确表达,为TLR1识别机制及信号转导机制研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹新梅	泸州医学院基础医学院	20	28	2.0	4.0
2	黄黎	泸州医学院基础医学院	29	98	6.0	8.0
3	李祥	泸州医学院公共卫生系	23	101	6.0	9.0
4	年四季	泸州医学院基础医学院	12	50	4.0	6.0
5	袁青	泸州医学院基础医学院	15	54	5.0	6.0
6	周云刚	泸州医学院基础医学院	11	24	3.0	4.0