山羊脂肪酸合酶基因(FASN)启动子结构与功能的初步分析

• 作者: 孙雨婷 朱江江 李君 石恒波 罗军 葛婷 赵旺生 郝娟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 脂肪酸合酶 启动子 山羊乳腺上皮细胞
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 204-210
• 分类号: S827|Q752
• 字数: 5881字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在对山羊脂肪酸合酶基因(Fatty acid synthase,FASN)启动子进行结构与功能的初步分析,进而对其转录调控机制进行探讨.采用PCR技术从西农萨能羊基因组DNA中克隆FASN基因启动子,通过缺失分析,构建7个包含不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,转染山羊乳腺上皮细胞和MCF-7细胞,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动活性.结果表明,克隆得到FASN基因的启动调控序列2 589 bp,生物信息学分析发现,该启动子序列含有典型的启动转录元件TATA-box和E-box,分别位于转录起始位点(+1)上游-41和-74 bp处.报告基因分析表明,启动子核心区域定位在-293～-79 bp,在线软件预测发现,该区域含有Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子结合位点.结果显示,FASN基因启动子前端存在负调控元件,Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子可能参与FASN基因的转录调控.