丝状噬菌体pⅧ展示系统表达赭曲霉毒素A模拟表位及应用研究

• 作者: 刘仁荣 徐玲 朱立鑫 裘雪梅 陈兴龙
• 来源期刊: 卫生研究
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示 噬菌粒 赭曲霉毒素A 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 814-818
• 分类号: TS207.4|R155.31
• 语种: 中文

摘要

目的 传统赭曲霉毒素A(OTA)竞争抗原毒性强、成本高、制备难度大.将OTA模拟表位展示于丝状噬菌体pⅧ表面,获得无毒、易于制备的OTA竞争抗原替代物.方法 构建带有OTA模拟表位的重组噬菌粒pC89-COTA,为了提高OTA模拟表位与抗体的结合率,在OTA模拟表位序列5’端引入了肠激酶酶切位点.噬菌粒转化进大肠杆菌XL1-blue后再经野生KM13噬菌体感染,获得带有OTA模拟表位的重组噬菌体.用该噬菌体代替竞争抗原建立OTA的无毒ELISA分析方法.结果 成功表达出带有OTA模拟表位的重组噬菌体,经肠激酶酶切的OTA模拟表位噬菌体与OTA抗体的结合效率显著高于未酶切的噬菌体.利用酶切后的噬菌体建立OTA的无毒ELISA分析方法,其最低检出限为100pg/ml,线性范围为250pg/ml～1000pg/ml.进行加标回收实验,回收率为99.8％ ～ 112.3％,相对标准偏差为8.19％ ～11.64％,测试16份市售样品,阳性率为31.25％.结论 成功表达了OTA模拟表位噬菌体,建立了OTA的无毒ELISA检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裘雪梅	江西科技师范大学生命科学院	22	73	5.0	6.0
2	刘仁荣	江西科技师范大学生命科学院	31	147	6.0	10.0
3	徐玲	江西科技师范大学生命科学院	23	116	5.0	10.0
4	朱立鑫	江西科技师范大学生命科学院	13	30	4.0	5.0
5	陈兴龙	江西科技师范大学生命科学院	3	6	1.0	2.0