噬菌体展示系统表达玉米赤霉烯酮模拟表位肽

• 作者: 刘仁荣 徐富勇 徐玲 朱立鑫 裘雪梅
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 噬菌体展示系统 玉米赤霉烯酮 模拟表位 肠激酶
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 144-150
• 语种: 中文

摘要

拟用pⅧ噬菌体展示系统表达玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)模拟表位肽,并验证其反应原性.通过将含有ZEN模拟表位序列以及肠激酶酶切位点的寡聚核苷酸与经过EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切的pC89S4噬菌粒连接,构建表达载体pC89-CZEN.pC89-CZEN转化感受态XL1-Blue得到工程菌pC89-ek-zen,然后用KM13超感染、IPTG诱导表达,纯化后得到展示有玉米赤霉烯酮模拟表位的噬菌体颗粒.对KM13超感染时菌体浓度OD600、IPTG诱导时菌体浓度OD600、IPTG加入量以及诱导表达温度和时间进行优化,以探索最佳表达条件；通过ELISA测定反应原性,对比肠激酶酶切前后模拟表位肽与ZEN抗体的结合效果.结果显示,成功构建了表达载体pC89-CZEN,最优表达条件为KM13超感染时菌体浓度OD600为0.4、IPTG诱导时菌体浓度OD600为0.6以及IPTG加入量为终浓度1.0 mmol/L、诱导表达温度为24℃、时间8h,酶切后结合效果明显高于酶切前.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裘雪梅	江西科技师范大学生命科学学院	22	73	5.0	6.0
2	刘仁荣	江西科技师范大学生命科学学院	31	147	6.0	10.0
3	徐玲	江西科技师范大学生命科学学院	23	116	5.0	10.0
4	朱立鑫	江西科技师范大学生命科学学院	13	30	4.0	5.0
5	徐富勇	南昌大学生命科学与食品工程学院	2	1	1.0	1.0