2型猪链球菌表面蛋白 Hp0272的原核表达及其结合人血清 IgA 的活性分析

• 作者: 任志强 姜永强 甘淑珍 袁媛 郑玉玲 陈福生
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 猪链球菌 Hp0272 原核表达 人血清 IgA 特异结合
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 800-803
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 3145字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.06.007

摘要

目的:构建带 GST 标签的2型猪链球菌功能未知表面蛋白 Hp0272的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达,获得纯度较高的 GST-Hp0272重组融合蛋白,鉴定其与人血清 IgA(hIgA)的结合活性.方法:采用分子生物学方法构建pGEX-4T-1-0272重组表达载体,将其转入大肠杆菌 BL21(DE3)菌株,IPTG 诱导表达后,通过 SDS-PAGE 分析蛋白表达情况;用 GSTrap 柱亲和纯化目的蛋白并经 Western 印迹验证,采用配体印迹和 ELISA 方法鉴定 GST-Hp0272与hIgA 的结合活性.结果:构建了 GST 融合蛋白原核表达质粒,并获得 GST-Hp0272融合蛋白,鉴定到 Hp0272特异性地与 hIgA 结合,且结合区域位于 Hp0272的 N 端(41~318 aa).结论:获得了 GST-Hp0272融合蛋白,并鉴定到其能特异性结合 hIgA,为进一步了解 Hp0272在猪链球菌致病过程中的作用提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑玉玲	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	33	110	6.0	9.0
2	姜永强	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	44	201	7.0	11.0
3	陈福生		107	1106	19.0	29.0
4	甘淑珍	华中农业大学食品科学技术学院	3	105	2.0	3.0
5	任志强	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	1	1.0	1.0
6	袁媛	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	5	15	3.0	3.0