AKR1B10基因过表达载体的构建及其在乳腺癌MCF-7细胞中的表达

• 作者: 何鑫 倪劲松 刘素菊 宫鹏涛 张国才 张西臣 李建华 李泽中 邢沈阳 陈玉江
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: AKR1B10 真核表达载体 转染 乳腺肿瘤
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 465-470
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文

摘要

目的:构建AKR1B10基因真核表达载体pcDNA3.1 (+)-AKR1B10,观察其在乳腺癌MCF-7细胞中的表达,为研究AKR1B10基因与乳腺癌的关系提供实验依据.方法:构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-AKR1B10,将载体瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,利用RT-PCR与Western blotting方法检测未转染的MCF-7细胞、转染pcDNA3.1(+)-AKR1B10的MCF-7细胞和转染空质粒pcDNA3.1(+)的MCF-7细胞中AKR1B10基因的表达.结果:成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-AKR1B10.RT-PCR结果显示,将未转染的MCF-7细胞中AKR1B10基因表达量设定为1,转染质粒的MCF-7细胞中AKR1B10基因表达量为1.79,转染空质粒的MCF-7细胞表达量为0.98,转染表达载体细胞AKR1B10基因表达量与转染空质粒的细胞和未转染的细胞比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blotting结果显示,与未转染的MCF-7细胞和转染空质粒的细胞比较,转染表达载体pcDNA3,1( +)-AKR1B10的MCF-7细胞中AKR1B10基因表达量增多.结论:成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-AKR1B10,AKR1B10基因在转染表达载体的MCF-7细胞中高表达.