一种高通量免疫检测抗生素残留方法的建立

• 作者: 刘小雷 刘爽 王伟
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 卡那霉素 氯霉素 悬液芯片系统 免疫检测
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 分析质控与制剂
• 页码范围: 231-236
• 分类号: R927.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8689.2012.03.014

摘要

目的 将表面具有羧基的聚苯乙烯微球运用于悬液芯片系统中,建立一种高通量检测牛奶中卡那霉素和氯霉素残留的方法.方法 将合成的卡那霉素和氯霉素全抗原包被在聚苯乙烯微球表面构成捕获抗原,并对整个包被过程进行优化.利用捕获抗原、单克隆抗体及检测物构建间接竞争免疫检测体系,并用荧光标记的二抗作为荧光探针标记与捕获抗原结合的单克隆抗体得到悬液芯片系统的检测物.由于不同型号的微球被悬液芯片系统的激光激发后所呈现的侧向散射荧光(side scatter,SSC)和前向散射荧光(forward scatter,FSC)不同,所以悬液芯片系统能够将不同的微球进行区分以达到分辨不同检测物的目的,悬液芯片系统上的另外一套检测系统能够对每个微球表面荧光探针的荧光强度进行检测以实现定量分析,双检测系统同时工作实现了高通量检测的目的.结果 微球的包被优化实验结果表明,包被100μL微球需要卡那霉素和氯霉素全抗原的最佳量分别是12μg和17μg.单克隆抗体的最佳稀释倍数分别是800倍和1600倍；在牛奶基质中,该方法对卡那霉素和氯霉素的检测限分别是0.79ng/mL和52.01 ng/mL,半数抑制浓度(IC50)分别为36.65ng/mL和626.03ng/mL,检测范围分别为9～900ng/mL和90～900ng/mL;抗体特异性实验表明两种单克隆抗体的特异性良好.该方法在牛奶基质中的标准添加回收率为80％～110％,满足检测方法建立的要求.结论 利用基于微球技术的悬液芯片系统建立了一种高通量检测牛奶中抗生素残留的方法,该研究为下一步更多种抗生素残留的同步检测提供了数据依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小雷	内蒙古医学院药学院	47	327	10.0	16.0
2	刘爽	内蒙古医学院第二附属医院药剂科	24	260	8.0	15.0
3	王伟		13	75	6.0	8.0