猪圆环病毒2型ORF3基因的克隆及原核表达

• 作者: 刘航 尚佑军 尹双辉 杨晓燕 杨顺利 田永强
• 来源期刊: 湖南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环2型 ORF3 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 园林园艺·畜牧水产
• 页码范围: 120-122
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 2456字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-060X.2012.03.035

摘要

以细胞总基因组提取试剂盒抽提PCV2细胞毒株总DNA为模板,用特异性引物扩增PCV2 ORF3基因.将ORF3和表达载体pGEX-6p-1用BamH I和Sal I双酶切回收后连接,将测序验证为阳性的重组质粒命名为pGEX-6p-1 -ORF3.重组质粒pGEX-6p-1 -ORF3转化BL21(DE3)后用IPTG诱导表达并纯化,对获得的表达产物进行SDS-PAGE电泳、Western blot检测.结果表明:PCV2 ORF3在pGEX-6p-1中获得了高效表达,其表达蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量约为37 kD,且能够和PCV2阳性血清发生特异性相互作用,具有免疫学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尚佑军	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学国家重点实验室	37	117	6.0	10.0
2	尹双辉	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学国家重点实验室	12	113	3.0	10.0
3	刘航	兰州交通大学化学与生物工程学院	6	19	2.0	4.0
4	杨晓燕	兰州交通大学化学与生物工程学院	9	9	2.0	2.0
5	田永强	兰州交通大学化学与生物工程学院	31	126	5.0	10.0
6	杨顺利	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学国家重点实验室	4	8	2.0	2.0