HBV X基因转染L02细胞及其蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响

• 作者: 刘玉元 张卿 张绪清 李俊刚 赵博
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: HBV X基因 脂质体 电穿孔 HLA-DR CⅡTA
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 933-937
• 分类号: R373.21|R394-33|R394.3
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨脂质体和电穿孔法在HBV X基因转染L02细胞中的差别及X基因蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响.方法 构建HBV X基因重组表达质粒,通过电穿孔和脂质体法转染人正常肝细胞L02细胞,以绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP)表达水平评价转染效率,流式细胞技术检测L02细胞HBV X蛋白的表达水平.RT-PCR、流式细胞技术及western-blot分析L02细胞、转染空载体以及转染HBV X基因重组表达质粒的L02细胞CⅡTA和HLA-DR的表达差别.结果 采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000的转染效率为(6.4±3.5)％,显著低于电穿孔法(41.46±5.8)％,P＜0.01.脂质体法转染的L02细胞HBV X蛋白表达水平为(5.1±3.9)％,显著低于电穿孔方法(37.5±4.1)％表达,P＜0.01.转染了HBV X基因重组表达质粒的L02细胞检测到CⅡTA和HLA-DR mRNA和蛋白表达,而L02细胞本身及转染空载体的L02细胞未检测到CⅡTA和HLA-DR的表达.结论 HBV X基因真核表达载体pHBx-IRES2 -EGFP通过电穿孔法转染L02细胞较脂质体法有明显较高的转染效率和更高的目的基因的表达,HBV X基因诱导了L02细胞中CⅡTA和HLA-DR的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李俊刚	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	17	85	5.0	8.0
2	张绪清	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	39	206	9.0	13.0
3	张卿	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	7	12	2.0	3.0
4	刘玉元	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	2	4	1.0	2.0
5	赵博	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	3	27	2.0	3.0