实时荧光定量PCR技术的优化及其在恙虫病东方体诊断中的应用

• 作者: 何凤屏 刘玉兰 周建英 周海燕 唐建红 徐新 柯昌文 王江桥 王箭 管振祺 罗君 郑礼杰
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恙虫病东方体 聚合酶链反应 基因分型
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 临床检验研究论著
• 页码范围: 1422-1424
• 分类号: R513.2
• 字数: 4017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2012.12.006

摘要

目的 建立一种优化的实时荧光定量PCR技术,并用于诊断粤北山区恙虫病东方体(Ot)基因型.方法 采用优化实时荧光定量PCR技术对感染Ot的患者和鼠类的血液和组织标本检测Ot DNA载量并分析其基因型,并与未优化实时荧光定量PCR和巢式PCR的检测结果进行比较.结果 采用优化实时荧光定量PCR技术检测660例发热患者,有224例检测到Ot,其中108例是发热5 d内的早期患恙虫病患者,以及在55份鼠类的标本中有12份能检测到感染Ot,均为Gilliam型;未优化实时荧光定量PCR在患病7 d以上才能检测到Ot.同时,在鼠类基因扩增片段还显示出与Gilliam、Karp、Kato 3株国际参考株不同,经巢式PCR分型证实为Kawasaki型,与巢式PCR基因分型的结果相符.结论 优化实时荧光定量PCR技术可作为早期诊断恙虫病的实验方法,用于快速分析Ot基因型,适合在基层医院推广应用.