实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体

• 作者: 孙长俭 张晶波 朱丽娜 李青凤 杨晓 温博海 牛东升 陈梅玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 恙虫病东方体 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 228-231
• 页数: 4页
• 分类号: R376
• 字数: 3415字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.03.010

摘要

目的建立检测恙虫病东方体的实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR)方法.方法根据恙虫病东方体56kD外膜蛋白基因序列设计引物和探针,以克隆的56kD基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量PCR检测方法.结果建立的荧光定量PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.999).荧光定量PCR检测恙虫病东方体的灵敏度约为套式PCR的100倍,并且具有良好的重复性.用该定量PCR检测其它相关立克次体和病原菌DNA样本,检出结果均为0.用该定量PCR检测恙虫病东方体实验感染小鼠的血、脾脏、肺脏、肝脏标本,结果脾脏中东方体出现最早和检出量最多,肝脏和肺脏次之.血中的恙虫病东方体量较低.结论本研究建立的荧光定量PCR方法具有很高的特异性和敏感性,可用于东方体感染早期血样本的快速检测作恙虫病感染早期诊断,并且可以定量分析评价恙虫病东方体感染的程度.