锰致PC12细胞凋亡作用及与p- Erk关系

• 作者: 侯顺利 刘红 卢娟 左晶 徐强 徐文 李金翠 杨银书 缪珊 董大海 闫文 高丽莉 高琨
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 锰 鼠嗜铬神经瘤细胞 氧化应激 凋亡 磷酸化的胞外信号调节激酶
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 51-53
• 分类号: Q593.1|R135
• 语种: 中文

摘要

目的 以鼠嗜铬神经瘤细胞(PC12)为模型,筛选锰对神经细胞增殖抑制作用的时间及剂量,观察锰作用下PC12细胞的细胞形态学、生化指标改变和磷酸化的胞外信号调节激酶(p - Erk)的表达.方法 用200、400、600、800 μmol/L MnCl2的培养液,分别作用对数生长期PC12细胞1、2、3、4d后,四甲基偶氮塞唑蓝(MTT)筛选锰的细胞毒性剂量；透射电镜观察细胞形态学变化；琼脂糖凝胶电泳检测MnCl2对PCl2细胞基因组DNA的影响.免疫印迹法( western blot)检测p- Erk.结果 MTT显示200～800 μmol/L MnCl2作用1、2、3、4d对PC12有显著的抑制作用,呈剂量和时间依赖趋势,600 μmol/L MnCl2作用4d对PC12的抑制率50％；600 μrnol/L MnCl2作用4d电镜可见细胞凋亡,同样条件下细胞DNA碎片化；Western blot显示600μml/oL MnCl2作用1、2、3、4d可见p- Erk2逐渐降低,其中作用2d时较对照降低75％(n=3,P＜0.05),200、400、600 μmol/L MnCl2分别作用4d时,p- Erk亦逐渐降低,当400 μmol/L MnCl2作用4d时较对照明降低78％(n=3,P＜0.01)；使用Erk通路MEK1/2特异性阻制剂PD98059实验结果表明:锰可能通过MEK1/2磷酸化下游的Erk,下调p- Erk.结论 锰对PC12细胞的毒性作用可能是通过关闭胞外信号调节激酶ErK通路诱导细胞凋亡.