人B7-H4基因转染细胞株的构建及其对T细胞的作用

• 作者: 刘艳萍 徐慧 房鹏 李玉云 禹莉 顾宗江
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 协同刺激分子 B7-H4 基因转染细胞
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 249-253
• 分类号: Q78
• 字数: 3299字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1007-6611.2012.04.003

摘要

目的 克隆人B7-H4基因,构建人B7-H4基因转染细胞株并初步研究其对T细胞的作用. 方法 通过RT-PCR的方法获得人B7-H4分子的基因,将目的片段双酶切(EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ)后与pIRES2-EGFP真核表达载体连接,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4并进行鉴定；脂质体转染法将重组载体导人L929细胞,经G418加压筛选并通过流式细胞术和RT-PCR检测表达载体是否转入L929细胞中,通过检测活化T细胞上CD25,CD69的表达及T细胞增殖实验对B7-H4转基因细胞的生物学功能进行初步研究. 结果 从外周血活化单核细胞中扩增出目的基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4并将其转染至L929细胞,构建了一株稳定表达人B7 -H4分子的基因转染细胞株,对其生物学功能的研究显示B7-H4分子可以下调活化T细胞上CD25,CD69的表达,并且对T细胞的活化增殖起到抑制作用(P＜0.05). 结论 成功构建了稳定表达B7-H4分子的基因转染细胞株,为进一步研制B7-H4分子的单克隆抗体提供了有效的免疫原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	房鹏	苏州大学医学生物技术研究所	7	24	2.0	4.0
2	刘艳萍	苏州大学医学生物技术研究所	22	137	6.0	11.0
3	顾宗江	苏州大学医学生物技术研究所	30	139	7.0	11.0