β-葡萄糖苷酶高产菌株的筛选及其基因的克隆与表达

• 作者: 刘逸寒 李玉 王建玲 王斌斌 路福平
• 来源期刊: 化学与生物工程
• 学科: 生物学
• 关键词: 短小芽孢杆菌 β-葡萄糖苷酶 克隆 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 66-70
• 分类号: Q78|Q556.2
• 字数: 4235字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5425.2012.06.020

摘要

利用栀子苷培养基从滨海新区盐碱地土样中筛选得到一株高产β-葡萄糖苷酶菌株,酶活力达到14.82U·mL-1,经16S rDNA鉴定,命名为短小芽孢杆菌B-4.克隆获得B-4 β-葡萄糖苷酶基因,测序结果表明,其大小为1437bp,与GenBank中短小芽孢杆菌SAFR-032 β-葡萄糖苷酶基因YP_001488769.1序列比对,核苷酸序列同源性达97％,氨基酸序列同源性达99％.进一步利用表达载体pET-22b(+),实现β-葡萄糖苷酶基因bglB在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达,酶活力达46.85U·mL-1.