抗人CD86双价抗体的表达及与抗原的结合特性

• 作者: 夏永洁 孔永 安萌 朱华亭 王婧 王志强 邱玉华 韩莲花
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人CD86 CHO细胞 双价抗体 抑制增殖
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 1173-1176
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文

摘要

目的:用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达抗人CD86双价抗体(CD86-diabody),鉴定该抗体对表达CD86分子肿瘤细胞的识别及介导的生物学效应.方法:从分泌抗人CD86小鼠源抗体的杂交瘤1D1中克隆抗体重、轻链可变区基因VH及VL.SOE-PCR构建VH-(GGGGS)-VL双价抗体基因,整合到真核表达载体plRES2-EGFP中,脂质体法转染CHO细胞,FCM筛选G418加压培养的阳性克隆.IMAC纯化并定量抗体.免疫荧光法分析抗体对人B系淋巴瘤细胞株Raji及Daudi膜型CD86分子的阳性结合率,将抗体加入到Raji细胞的培养体系中,培养72 h,MTT法分析抗体对细胞体外增殖的影响.结果:获得了稳定分泌抗人CD86-diabody的CHO细胞株.培养上清中抗体纯品的得率为5.24 mg/L.抗体与Raji及Daudi细胞的阳性结合率分别为77.2％及70.6％.经抗体孵育72 h,Raji细胞体外增殖抑制率为37％.结论:成功制备了抗人CD86-diabody,可特异性结合细胞膜型CD86分子,并对表达该分子的肿瘤细胞体外增殖具有抑制效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志强	苏州大学医学部免疫学系	20	155	6.0	12.0
2	邱玉华	苏州大学医学部免疫学系	89	426	11.0	15.0
3	韩莲花	苏州大学医学部免疫学系	42	127	6.0	8.0
4	王婧	苏州大学医学部免疫学系	35	53	4.0	5.0
5	朱华亭	苏州大学医学部免疫学系	23	96	6.0	9.0
6	夏永洁	苏州大学医学部免疫学系	12	8	2.0	2.0
7	孔永	苏州大学医学部免疫学系	9	9	2.0	2.0
8	安萌	苏州大学医学部免疫学系	1	0	0.0	0.0