霍乱弧菌中弧菌素合成酶VibF的A结构域基因的克隆、表达与纯化研究

• 作者: 刘秀华 徐素娟 王执
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 霍乱弧菌 A结构域 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 149-153
• 分类号: S852.61
• 字数: 3021字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2012.03.038

摘要

弧菌素合成酶的A结构域在弧菌素的合成过程中发挥着重要作用.使用DNAStar软件对A结构域的蛋白质二级结构进行预测,截取了多组不同氨基酸长度的A结构域片段.使用PCR方法从霍乱弧菌N16961的基因组中克隆了A结构域基因,通过酶切、连接等方法将其构建到表达载体pET- 21b(+)上,并在大肠杆菌BL21 (DE3)中得到高效表达.在30个不同氨基酸长度的A结构域蛋白片段中获得5个可溶性表达的片段；并且通过三步分离纯化的方法获得了一性状良好、均一和高纯度的A结构域蛋白(N861-1410),从而为A结构域蛋白质晶体生长提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘秀华	河北大学生命科学学院	24	94	6.0	8.0
5	王执	山东大学微生物技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
6	徐素娟	山东大学微生物技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0