基于多重串联式PCR的基因碟片技术检测转基因作物

• 作者: 吴希阳 白卫滨 陈贞 马骏 魏霜
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因 多重串联式PCR 基因碟片技术
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1010-1016
• 分类号: S188
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.05.023

摘要

[目的]建立基于多重串联式PCR(multiplexed tandem PCR,MT-PCR)的基因碟片技术,并使之应用于转基因作物的大量、快速和稳定地检测.[方法]以转基因作物研究中常用的调控序列NOS终止子、FMV35S启动子及外源基因NPTⅡ、Cry1Ab、Cry1Ab/Ac、CP4-EPSPS、PAT和玉米内源基因ⅠVR、棉花内源基因sad1、菜籽粕内源基因PEP为检测对象,针对每个基因设计内外2对引物,先进行一次循环数较少(10-20 cycles)的高通量多重PCR,以便在均匀地扩增各基因和调控序列的同时避免引物之间的竞争,然后利用巢式荧光定量PCR检测各个基因和调控序列,最后根据扩增曲线和熔融曲线分析结果.[结果]该方法能够快速(＜2 h)、高通量、准确地(＞0.000292 ng)检测出棉花、玉米、大米、菜籽粕中的多种转基因成分,可以分辨出3种转基因物种,适合大批量检测.[结论]该方法适合转基因作物的高通量、定量检测,具有较好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白卫滨	暨南大学理工学院食品科学与工程系	32	208	6.0	13.0
2	马骏	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	37	385	9.0	18.0
3	吴希阳	暨南大学理工学院食品科学与工程系	72	500	12.0	18.0
4	陈贞	暨南大学理工学院食品科学与工程系	3	32	3.0	3.0
5	魏霜	暨南大学理工学院食品科学与工程系	7	88	4.0	7.0