大鼠组织因子基因克隆及其在C6细胞系中的表达

• 作者: 何俊明 周淑如 张凤民 方文娟 李玉军 王宝英 王金冬
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 凝血致活酶 基因克隆 pEGFP-N1 C6细胞
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1422-1425
• 页数: 4页
• 字数: 3264字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2012.09.012

摘要

目的:克隆大鼠组织因子(tissue factor,TF)基因,构建真核表达载体pEGFP-N1-TF,转染C6大鼠神经胶质瘤细胞并检测转染细胞内TF表达水平.方法:采用RT-PCR法从Wistar大鼠肺组织中扩增TF基因,克隆到真核表达载体pEGFP-N1上.通过测序鉴定重组质粒中插入TF的完整性和可靠性.应用脂质体法将鉴定正确的重组质粒转入C6细胞中,荧光显微镜下观察EGFP报告基因的表达强度和转染效率,并对转染细胞的TF-eGFP融合蛋白进行Western blot检测.结果:成功构建pEGFP-N1-TF真核表达载体,转染C6细胞24 h后,在荧光显微镜下可以观测到荧光,并通过Western blot技术检测到TF-eGFP融合蛋白的表达.结论:重组真核表达载体pEGFP-N1-TF构建成功,转染C6细胞后获得了良好的瞬时表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张凤民	哈尔滨医科大学病原微生物教研室	120	825	13.0	23.0
2	李玉军	哈尔滨医科大学病原微生物教研室	11	62	5.0	7.0
3	王金冬	新乡医学院三全学院	3	17	2.0	3.0
4	何俊明	哈尔滨医科大学病原微生物教研室	1	0	0.0	0.0
5	方文娟	哈尔滨医科大学病原微生物教研室	1	0	0.0	0.0
6	王宝英	哈尔滨医科大学病原微生物教研室	1	0	0.0	0.0
7	周淑如	哈尔滨医科大学病原微生物教研室	1	0	0.0	0.0