NF-κB基因RNA干扰质粒的构建与鉴定

• 作者: 方淑环 龚青
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 核因子-κB RNA干扰 质粒
• 年，卷（期）: 2012,（33）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3504-3505,3508
• 页数: 3页
• 字数: 2300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2012.33.017

摘要

目的 构建转录因子NF-κB的RNA干扰(RNAi)质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路及以其为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi质粒.方法 设计针对NF-κB的shRNA特异性序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer 1.0-U6表达载体,EcoRⅠ和ApaⅠ双酶切及DNA测序鉴定重组克隆;脂质体转染RNAi重组载体至前列腺癌细胞PC-3后,Western blot分析各组NF-κB蛋白表达水平.结果 双酶切和DNA测序证实shRNA正确插入pSilencer 1.0-U6质粒; Western blot结果显示与空质粒对照组比较NF-κB转染组细胞NF-κB表达明显下调.结论 成功构建人NF-κB基因RNAi质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路提供了稳定转染细胞的干扰质粒,为靶向NF-κB的基因治疗提供了有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚青	广州医学院基础学院生化教研室	5	4	1.0	2.0