DHFR基因RNA干扰质粒载体的构建及鉴定

• 作者: 唐步坚 张玮 李力 李状 王琪 阳志军
• 来源期刊: 肿瘤预防与治疗
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 二氢叶酸还原酶(DHFR) pGPU6
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 应用基础研究
• 页码范围: 210-214
• 分类号: R73-3|R737.31
• 字数: 4831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0904.2012.04.002

摘要

目的:构建二氢叶酸还原酶(dyhidrofolate reductase,DHFR)基因RNA干扰质粒载体,为探讨抑制DHFR基因表达在卵巢癌铂类耐药治疗中的意义奠定基础.方法:设计DHFR基因靶向的发夹状siRNA,筛选出最佳siRNA沉默片段,退火后连接入pGPU6/GFP/Neo载体,转化后进行序列鉴定,脂质体转染SKOV3细胞株,并进行荧光摄像.结果:将退火后的双链寡核苷酸片段连接到pGPU6/GFP/Neo载体,测序结果正确.转染SKOV3细胞后,PCR鉴定干扰效果,G418筛选稳定细胞株.结论:成功构建针对DHFR基因的siRNA载体,找到了有效的干扰靶序列,转染SKOV3细胞后,DHFR基因的表达明显减弱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李力	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	377	1810	20.0	26.0
2	张玮	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	149	564	13.0	17.0
3	唐步坚	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	67	353	11.0	16.0
4	王琪	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	87	263	8.0	11.0
5	阳志军	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	75	290	8.0	12.0
6	李状	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	12	21	3.0	3.0