茶树TRAP反应体系的建立及正交设计优化

• 作者: 张丽群 成浩 王丽鸳 韦康
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 茶树 TRAP 正交设计 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2012,（28）
• 所属期刊栏目: 园艺—研究报告
• 页码范围: 220-226
• 页数: 7页
• 分类号: S571.1|Q523
• 字数: 4062字
• 语种: 中文

摘要

TRAP标记技术因操作简单、重复性好、效率高等特点得到广泛应用,但该技术在茶树中的研究报道较少,且茶树TRAP-PCR体系优化尚未见报道.笔者采用正交设计的方法,对茶树TRAP-PCR反应中Mg2+、Taq酶、dNTP、固定引物、随机引物5个因素进行了优化研究,建立了茶树TRAP-PCR最佳反应体系.该20μL反应体系含有2μL 10×PCR Buffer (Mg2+ free),50 ng模板DNA,1.75 mmo/L Mg2+,0.50 U Taq酶,0.20 mmol/L dNTP,0.20 mmol/L随机引物和0.20 mmol/L固定引物.根据优化结果,利用最佳反应体系,选用16个茶树品种对TRAP标记多态性进行了初步研究.