米哚妥林对P糖蛋白介导的多药耐药的逆转作用

• 作者: 任志广 彭晖 李新颖 贾砚寒 赵青 马远方 魏寅祥 黎燕
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 米哚妥林 多药耐药相关蛋白 糖蛋白类 蛋白激酶抑制剂
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 77-83
• 页数: 7页
• 分类号: R979.1
• 字数: 4683字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2013.01.015

摘要

目的 评价新型激酶抑制剂类抗癌药米哚妥林逆转P糖蛋白(P-gp)介导肿瘤细胞多药耐药的作用,并探讨其可能机制.方法 米哚妥林0.5,1和5 μmol·L-1分别加入P-gp高表达的K562/A02和K562细胞中培养72 h,MTS法测定细胞存活率以检测细胞毒性.米哚妥林0.125,0.25和0.5 μmol· L-1在K562/A02和K562细胞中与无毒剂量的P-gp底物多柔比星、紫杉醇或长春新碱共培养72 h,MTS法测定细胞存活率以检测逆转耐药作用.米哚妥林0.5和10 μmol· L-1与P-gp荧光底物罗丹明123在耐药和敏感细胞中共同孵育30 min后用流式细胞术分析底物积累的变化.米哚妥林0.5 μmol·L-1与耐药和敏感细胞共同孵育72 h,Western印迹法检测耐药蛋白和信号分子的表达,定量PCR检测MDR1基因表达的变化.将米哚妥林与P-gp膜蛋白共孵育,化学发光法测定剩余ATP的量,检测米哚妥林对P-gp ATP酶活性的影响.结果 米哚妥林对P-gp高表达的K562/A02和亲本敏感细胞K562的细胞毒性无明显的差异,其中米哚妥林0.5 μmol· L-1时2种细胞的存活率均达80％以上.米哚妥林0.5 μmol·L-1在细胞水平即可有效逆转K562/A02对多种底物的耐药,而对敏感细胞无显著作用;米哚妥林能显著抑制P-gp的外排作用,增加底物Rh-123在K562/A02细胞中的积累,且效果好于阴性对照维拉帕米0.5和10 μmol·L-1;米哚妥林对P-gp基因和蛋白表达以及AKT和ERK的表达与磷酸化水平均无影响;米哚妥林对P-gp的ATP酶活性具有明显的抑制作用.结论 米哚妥林可抑制P-gp介导的药物外排并逆转P-gp介导的肿瘤多药耐药.