钩端螺旋体groEL基因原核表达及其产物免疫保护作用

• 作者: 严杰 李小余 王银环 程东庆
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 问号钩端螺旋体 GroEL蛋白质/遗传学 重组,遗传 基因表达 序列分析,DNA 免疫法,被动 groEL基因 原核表达 免疫保护
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 164-170
• 页数: 7页
• 分类号: R377.5
• 字数: 4854字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2013.02.006

摘要

目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株groEL基因原核重组表达系统,了解重组表达的GroEL蛋白(rGroEL)对金地鼠的免疫保护作用.方法:采用高保真PCR扩增问号钩体赖株groEL基因并测序,常规方法构建groEL基因原核表达系统.采用SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图像分析系统检查rGroEL表达情况及其可溶性,Ni-NTA亲和层析法提纯rGroEL.观察rGroEL免疫金地鼠对问号钩体赖株感染的保护率.采用MAT法检测免疫动物血清与我国流行问号钩体血清群交叉凝集效价.结果:所克隆的groEL基因核苷酸和氨基酸序列与GenBank中相应基因完全相同.所构建的groEL基因原核表达系统能表达可溶性rGroEL.100和200 μgrGroEL对金地鼠的免疫保护率分别为50.0％和75.0％.rGroEL免疫金地鼠血清可不同程度地凝集各问号钩体血清群.结论:GroEL蛋白是问号钩体属特异性保护性抗原,可用于制备通用性钩体基因工程疫苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程东庆	浙江中医药大学生命科学学院	78	524	12.0	19.0
2	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
3	李小余	浙江中医药大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0
4	王银环	浙江中医药大学生命科学学院	5	32	3.0	5.0