HA-2FKBP-ABD融合蛋白的原核表达及与BCR-ABL的相互作用

• 作者: 冯文莉 李会 李千音 钟梁 高淼 黄峥兰
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原核表达 蛋白质纯化 BCR-ABL 慢性粒细胞白血病 ABL结合结构域
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 268-271
• 页数: 4页
• 分类号: R733.722
• 字数: 3786字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建经原核表达和纯化的HA-2FKBP-ABD(HF2A)融合蛋白,探讨HF2A对BCR-ABL的靶向作用.方法 用PCR扩增HF2A片段,将HF2A克隆入pET32a(+)原核表达载体,IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化HF2A蛋白,SDS-PAGE分析诱导和纯化的条件,western blot鉴定HF2A蛋白的表达,pull down实验检测HF2A与BCR-ABL的相互作用.结果 重组原核表达载体经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确；0.1 mmol/L IPTG 25℃诱导4h获得HF2A蛋白的高表达,其分子量(Mr)约为74 000,纯化后可获得高纯度的HF2A蛋白；HF2A与BCR-ABL能相互作用.结论 成功表达并纯化了HF2A融合蛋白,HF2A能够靶向作用BCR-ABL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯文莉	重庆医科大学临床血液学教研室	94	473	12.0	18.0