长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 付瑞 冯育芳 卫礼 岳秉飞 李晓波 王吉 王淑菁 贺争鸣
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠肝炎病毒 反转录聚合酶链式反应 长爪沙鼠 小鼠
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 58-63
• 页数: 6页
• 分类号: R33
• 字数: 4142字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2013.002.015

摘要

目的 建立长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MHV的检测.方法 根据已发表的小鼠肝炎病毒(MHV)S基因序列,设计合成引物.提取MHV细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增.优化反应条件,进行特异性、敏感性、稳定性、重复性试验.并对65只长爪沙鼠及12只小鼠进行检测.结果 建立的MHV RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定.以MHV RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为3.1 pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-3/mL.65只沙鼠经RT-PCR检测,均为阴性,12只小鼠经RT-PCR检测,有3只MHV阳性,测序结果与Genbank中MHV核酸序列同源性均为97%.结论 建立的长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法可用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MHV的检测.